表面等離子共振儀 SPR 分子相互作用儀
價格:¥300-5000元/樣 寄樣前充分溝通
樣品處理要求:1.分析物(蛋白或核酸)溶于需含有0.5%P20的PBS或HEPES緩沖液體系中,,蛋白濃度建議1mg/ml及以上(如果確實難以達(dá)到,請聯(lián)系管理員設(shè)計實驗方案),。2.配體(蛋白,、核酸或者小分子)溶于PBS或者HEPES緩沖液體系中,至少100ug/ml,。要求不含有甘油等折光率高的成分,,若體系中必須有DMSO,則需帶對應(yīng)溶劑純品于現(xiàn)場稀釋,,制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,。3.蛋白質(zhì)必須經(jīng)過純化,所用抗體建議選擇購買GE公司配套試劑盒產(chǎn)品,。
使用注意事項:所有溶液,、試劑等均采用18.2歐的超純水配制且必須經(jīng)過0.22 μm濾膜過濾。至少提前一天預(yù)約,,上機前請預(yù)留1-4小時的儀器預(yù)準(zhǔn)備時間。
常見問題:1.配體或小分子的錨定,,由于選擇的緩沖液不同,,有可能損失芯片通道,請實驗前務(wù)必與工程師或GE技術(shù)支持人員溝通選擇,。2.分析物的再生過程,,由于選擇的再生液不同,有可能損失芯片通道,,請實驗前務(wù)必與工程師或GE技術(shù)支持人員溝通選擇,。3. 樣品的濃度與純度直接影響最后的圖片質(zhì)量,試驗中根據(jù)需要會調(diào)試這些數(shù)據(jù),,請準(zhǔn)備足量的樣品
須自備的試劑及耗材:相應(yīng)的試驗芯片(型號的選擇可聯(lián)系工程師)及試劑盒,、1L以上含P20的PBS或者HEPES緩沖溶液、試驗中選擇的再生液,、試驗中所用GE公司配套的孔板或EP管
主要應(yīng)用范圍:可對蛋白(膜蛋白),、DNA/RNA、小分子,、脂類,、多糖、全細(xì)胞及病毒等的結(jié)合特性進(jìn)行研究,,提供準(zhǔn)確的親和力和動力學(xué)數(shù)據(jù),,判斷分子間互作的存在性和特異性。研究功能復(fù)合體形成的參與者,、協(xié)同者和組裝順序,。對藥物進(jìn)行篩選,,包括小分子及抗體藥物等。對小分子動力學(xué)準(zhǔn)確檢測,,提供分子結(jié)合的溫度與熱力學(xué)特征,,并對目標(biāo)分子活性含量進(jìn)行檢測。
SPR是一種利用物理光學(xué)現(xiàn)象測量生物大分子間相互作用特征參數(shù)的先進(jìn)儀器,。表面等離子波對附著在金屬表面的電介質(zhì)的折射率非常敏感,,而折射率是所有材料的固有特征。因此,,任何附著在金屬表面上的電介質(zhì)均可被檢測,,不同電介質(zhì)其表面等離子角不同。而同一種電解質(zhì),,其附著在金屬表面的量不同,,則SPR響應(yīng)強度不同?;谶@種原理的生物傳感器通常將一種具特異識別屬性的分子即配體固定于金屬膜表面,,監(jiān)控溶液中的被分析物與該配體的結(jié)合過程。在復(fù)合物形成或解離過程中,,金屬膜表面溶液的折射率發(fā)生變化,,隨即被SPR生物傳感器檢測出來。
SPR是一種萬用的無標(biāo)記系統(tǒng),,用于生物分子作用的詳細(xì)分析,,適用范圍從早期藥物開發(fā)研究到開發(fā),直至質(zhì)量控制,。系統(tǒng)提供高質(zhì)量動力學(xué),、親和性、濃度,、特異性,、選擇性以及熱動力學(xué)作用數(shù)據(jù),這些分析均實時地,、高靈敏度地完成,。此系統(tǒng)可以更高的精度和自信度完成動力學(xué)范圍末端發(fā)生的相互作用分析。與傳統(tǒng)的超速離心,、熒光法相比,,SPR技術(shù)無需純化各種生物組分即可實時監(jiān)測各類生物分子,如蛋白質(zhì),、核酸,、多糖、脂類,甚至全病毒,、細(xì)胞之間相互作用的整個過程,。利用SPR,研究人員可以了解兩種分子結(jié)合的特異性,,計算兩種分子的結(jié)合強弱(親和力),,結(jié)合過程的快慢(動力學(xué)),觀察生物分子的結(jié)合過程共有多少個協(xié)同者和參與者的先進(jìn)技術(shù),。主要用于各類小分子化合物,、多肽、蛋白質(zhì),、寡核苷酸和寡聚糖直至類脂,、噬菌體、病毒和細(xì)胞等相互作用的研究
Biacore SPR系統(tǒng)提供關(guān)于特異性,、濃度,、動力學(xué)和親和力的定量的相互作用數(shù)據(jù)。高質(zhì)量的綜合鑒定,,包括動力學(xué),、親和性、特異性,、濃度以及熱動力學(xué)的鑒定,;增進(jìn)對分子機理以及結(jié)構(gòu)-功能關(guān)系的理解;定義潛在的藥靶和診斷標(biāo)記物,;選擇和鑒定生物療法候選藥;藥物開發(fā)過程中選擇和優(yōu)化前導(dǎo)成分,;免疫原性研究中檢測和鑒定耐藥性抗體,。